牛成纤维细胞的分离与体外培养
叶 荣 陈学进1 杨利国2*
苏州大学生命科学学院，苏州215007；1 上海第二医科大学发育生物学研究中心，上海200025；2华中农业大学动物科技学院，武汉430070
摘要 : 研究了牛胎儿和成年牛皮肤组织成纤维细胞的分离、培养、纯化方法和生长特征。 通过组织块贴壁培养和分离单细胞接种培养均能获得原代牛皮肤细胞。用 2.5 g/L胰蛋白酶+1 mmol/L EDTA和5 g/L胶原酶I联合消化牛皮肤组织较2.5 g/L胰蛋白酶+1 mmol/L EDTA消化，得到更多的单个细胞，两者之间差异极显著（ P<0.01），但其死细胞比率却有较大升高；2.5 g/L胰蛋白酶+1 mmol/L EDTA消化牛胎儿组织得到的单细胞数显著高于皮肤组织消化后得到的细胞数 （P<0.01），死细胞比率也高于同种酶消化的皮肤组织。分离纯化的胎儿和皮肤成纤维细胞的生长 曲线都正常且相似。2.5 g/L胰蛋白酶+1 mmol/L EDTA消化贴壁细胞后死细胞率明显高于用0.5 g/L胰蛋白酶+0.53 mmol/L EDTA消化的细胞（P<0.05）；培养24 h后细胞贴壁率前者要明显低于后者（P<0.05）。用0.5 g/L胰蛋白酶轻度消化混杂生长的成纤维细胞和上皮样细胞，经过反复 贴壁传代2～3代，可得到较纯的成纤维细胞。
中文版
英文版