新型冠状病毒假病毒制备方法的优化及应用

该文旨在建立一种稳定高效的新型冠状病毒(SARS-CoV-2)假病毒构建方法, 并将 所制备的假病毒用于评估抗体中和水平。通过比较不同穿梭质粒、质粒配比以及转染试剂对假 病毒滴度的影响, 优化制备高滴度假病毒的条件; 通过制备不同的SARS-CoV-2突变株假病毒, 测 试该方法的稳定性; 利用所制备的假病毒对SARS-CoV-2抗体的中和能力进行评价, 测试该方法 的可靠性。优化结果表明, 当使用Lipofectamine™ 3000作为转染试剂时, pCDH-CMV-MCS-EF1- copGFP׃psPAX2׃pcDNA3.1-S以0.300 μg׃0.225 μg׃0.240 μg的质量比转染获得的假病毒滴度最高。 进一步, 发现利用该方法包装的三种突变株的假病毒均可达到较高滴度。利用该方法制备的假病 毒可以用于SARS-CoV-2抗体的中和活性检测, 测得IC50值为0.126 μg/mL。该研究成功建立了一种 简单高效的制备新型冠状病毒(SARS-CoV-2)假病毒的方法, 其可用于体外评估SARS-CoV-2抗体中 和活性, 为研发SARS-CoV-2相关疫苗和药物的体外评价提供了技术基础。