昆明白小鼠胚胎干细胞分离与体外培养

李　煜^*　梁　琳　王振飞　贾瑞贞　戴宝贞　李　瑶

内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室, 呼和浩特010021

摘要 : 为探索昆明白小鼠胚胎干细胞建系方法，将受孕4.5天的昆明白小鼠囊胚用免疫手术法去除滋胚层，然后将内细胞团(ICM)接种于胎鼠成纤维细胞饲养层上培养，形成的胚胎干细胞样集落用胰蛋白酶-EDTA消化法传代，培养后进行相差显微镜观察及碱性磷酸酶染色。结果饲养层上生长的ICM细胞呈典型的ES样细胞集落，传至第8代碱性磷酸酶染色呈强阳性。实验表明免疫手术法适用于昆明白小鼠ES细胞建系，获得的细胞集落具有ES细胞的主要生物学性状。