香鱼半乳糖凝集素3基因的克隆、鉴定和功能初探

摘要 : 半乳糖凝集素3(galectin-3, Gal3)是凝集素的一类, 在哺乳动物非特异性免疫中具有重
    要作用, 但在鱼类中尚未见研究报道。该研究通过香鱼(Plecoglossus altivelis)单核/巨噬细胞转录组测序获得Gal3(PaGal3)的cDNA序列, 全长2 009个核苷酸, 包含一个完整的开放阅读框, 推测其编码一个由380个氨基酸组成、相对分子质量为38.28 kDa的蛋白, 等电点为4.58, N-末端无信号肽。多重序列比对表明, PaGal3具有Galectin(Gal)家族成员典型的结构特征。系统进化树揭示, 各物种Gal3的进化关系符合目前广泛认可的动物分类关系, PaGal3与虹鳟(Oncorhynchus mykiss)Gal3紧密成簇, 氨基酸序列同源性达77%。实时荧光定量PCR结果表明, 鳗弧菌(Vibrio anguillarum)侵染后,香鱼肝、肾、脾等组织和单核/巨噬细胞中PaGal3的mRNA表达量显著上调。Western blot结果表明,PaGal3存在于香鱼血清中。抗体封闭PaGal3后, 香鱼单核/巨噬细胞吞噬细菌能力和杀菌活性均显著下降, 揭示PaGal3可以增强香鱼单核/巨噬细胞功能。综上, PaGal3与鱼类免疫紧密相关, 可能在香鱼炎症免疫中具有重要作用。