微流控芯片技术用于精子与上皮细胞分离的研究

欧元^1,2＃刘蔚然^3＃董军磊⁴ 李彩霞¹ 靳现霆⁵ 刘琳⁴ 赵兴春¹ 叶健^1*

¹公安部物证鉴定中心, 北京 100038; ²北京理工大学生命学院, 北京 100081; ³清华大学生物医学工程系, 北京100084; ⁴中国人民公安大学刑事科学技术学院, 北京 100038; ⁵太原铁路公安局临汾公安处, 临汾 041000

摘要 : 为研究建立使用微流控芯片技术分离精子与阴道上皮细胞的方法, 选用制作工艺简单的玻璃-PDMS芯片, 对混合样本进行分离。加样前分别在进、出口池中加入7 μL和10 μL缓冲液, 然后在进样口加入2 μL混合样本。至少静置8 min后, 从出口池中取出3 μL形成重力驱动的微流体后开始分离,每隔5 min在进样口补加1 μL缓冲液。达到理想分离效果时, 用移液器从出口池取出分离出的精子, 核酸酶去除游离DNA, 经过提取、扩增和电泳分离/检测等步骤得到精子的分型结果。结果显示, 使用基于重力驱动微流体原理的微流控芯片可在30 min内分离出精子, 不会有上皮细胞进入分离通道; 通过核酸酶对分离出的精子液的去游离DNA处理, 可得到单一、完整的精子分型。与传统的差异裂解法相比, 这种方法在很大程度上节省了检验时间, 在性侵案件中具有一定的法医物证分析价值。