创伤弧菌溶细胞素T和B有效联合表位的筛选与鉴定
王 波 丁 卉 谢旦立 楼永良* 肖美英 庞碧芳 严 杰1
温州医学院检验医学院, 浙江省医学遗传学重点实验室, 温州325035;1浙江大学医学院病原生物学教研室, 杭州 310031
摘要 : 利用生物信息学预测技术成功筛选出含部分创伤弧菌溶细胞素(Vibrio vulnificus hemolysin， VvhA)基因片段的T细胞、B细胞联合表位Vvha1、Vvha2、Vvha3和Vvha4， 通过噬菌体展示技术成功获得四段表位多肽M13KE-Vvha1、 M13KE-Vvha2、M13KE-Vvah3、M13KE-Vvha4， 且M13KE-Vvah2、M13KE-Vvha4抗原反应性强于M13KE-Vvha1、 M13KE-Vvha3。将四种抗原性多肽经腹腔注射ICR小鼠后， 利用流式细胞仪及ELISA方法检测小鼠CD4+ T淋巴细胞亚群及IL-2、IL-4、IL-6、IFN-g细胞因子时发现， 与M13KE-Vvha3相比， 经M13KE-Vvha1、M13KE-Vvha2、M13KE-Vvha4作用的小鼠CD4+ T淋巴细胞亚群的变化更为显著。与正常组相比， 该三组小鼠的IL-2、IL-4、IL-6、IFN-g细胞因子分泌量的变化都具有统计学意义; 而经M13KE-Vvha3作用的小鼠仅IL-4的改变具有明显统计学意义。因此本研究成功筛选出含部分VvhA片段的T细胞、B细胞联合表位Vvha2、Vvha4， 从而为进一步研制多抗原肽(multipleantigenic peptide， MAP)疫苗打下基础。
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