In-cell Western和Cell ELISA在大分子量蛋白质相对定量中的应用
高 翔 骞爱荣 李京宝 商 澎*
西北工业大学生命科学院, 西北工业大学特殊环境生物物理学研究所,空间生物实验模拟技术国防重点学科实验室, 西安710072
摘要 : 探讨两种新的检测方法——In-cell Western和Cell ELISA在大分子量蛋白质相对定量中的应用。将培养细胞原位固定、通透化、封闭，然后加入目标蛋白质的一抗、红外荧光标记的二抗或酶标记的二抗， 使用双红外成像系统或多功能酶标仪对目标蛋白质进行相对定量。通过这两种方法检测模拟失重环境对成骨细胞中大分子量骨架相关蛋白 ——微管微丝交联因子(microtubule actin cross-linking factor 1， MACF1）含量的影响， 结果表明模拟失重环境促进了MACF1表达， 且这两种方法检测结果一致。In-cell Western和Cell ELISA这两种检测方法灵敏迅速、操作简便， 可以用于大分子量蛋白质的相对定量。
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