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人外周血单核细胞释放PrPC 与其分泌Exosomes相关性研究


王桂花 周向梅 尹晓敏 杨利峰 杨建民 赵德明 *
中国农业大学动物医学院, 国家动物海绵状脑病实验室, 北京100193
摘要 : 为探求人外周血单核细胞是否分泌exosomes以及exosomes的分泌与细胞外环境中 PrPC的关系。采用密度梯度离心的方法从人外周血单核细胞系的培养基中提取exosomes, 并利用电镜技术和免疫印迹分析对其形态学和生物学特征进行鉴定。结果显示所提取的exosomes主要分布在1.13~1.16 g/ml的密度层中, 平均直径在30~100 nm之间, 呈杯状, 这与相关报道关于其他细胞分泌的exosomes特征分析的结果相一致; 与exosomes相关的分子Tsg101、flotillin-1、Hsp70、PrP C均为阳性标记, 而作为内质网标志蛋白的钙连接蛋白在exosomes上没有检测到。以上结果说明人外周血单核细胞分泌的exosomes没有被细胞器污染, 而且细胞向培养基中释放PrPC与其分泌exosomes有关。