CCL20基因敲低型人永生化角质形成细胞克隆的体外生长特性观察

摘要 : 采用MTT比色法、碘化丙啶染色法和直接免疫荧光双标记法分别观察 4个CCL20基因敲低型人永生化角质形成细胞(HaCaT 细胞)克隆(代号分别为II~V)的生长曲线、细胞周期以及表皮干细胞相关表型， 预期筛选出体外生物学性状良好的表皮种子细胞克隆。结果显示， 与未转染的HaCaT细胞(代号为I)比较， III~V在体外培养第5、6天的光密度值显著降低; III和IV的G₂+M期显著增多; IV和V表达CD49f⁺CD71^-的百分率显著升高， 而表达CD49f⁺CD71⁺、CD71⁺ 的百分率显著降低。可见， 4个CCL20基因敲低型HaCaT细胞克隆中仅有II表现出与未转染 HaCaT类似的体外生长特性， 该克隆有可能成为构建低免疫原性组织工程皮肤的表皮种子细胞。