靶向AKT的RNA干扰调控人乳腺癌细胞生长的体外研究

梅　玫¹　任　玉¹　周　旋²　祁艳斌¹　赵　川¹　申潇咏¹　姚　智^3,4*

天津医科大学, ¹天津市基础医学研究中心, ²附属肿瘤医院头颈一科, ³免疫教研室,⁴教育部免疫微环境与疾病重点实验室, 天津300070

摘要 : 采用Oligofectamine转染靶向AKT的siRNA至人乳腺癌细胞系MCF-7，利用real-time PCR检测AKT的表达水平; MTT及流式细胞术分析转染后细胞的生物学特征变化; 免疫荧光染色及Western印迹方法观察IA型PI3K/ AKT通路主要成员的表达变化。 Real-time PCR结果表明转染靶向AKT的 siRNA组可以有效敲低AKT的表达水平; MTT结果显示AKT siRNA治疗组细胞增殖率显著降低; 流式细胞术结果显示AKT siRNA转染组细胞在G₀/G₁期阻滞，凋亡比例明显高于空白对照组与空载体治疗组; 免疫荧光和Western印迹结果均表明转染AKT siRNA组细胞AKT、pAKT、Ki67、Bcl-2几个重要癌蛋白的表达水平均有明显的下调。以上结果表明运用AKT siRNA转染人乳腺癌细胞系MCF-7细胞后，可抑制其肿瘤细胞的增殖并诱导凋亡，因此AKT可以作为人乳腺癌基因治疗的候选靶点。