线粒体DNA缺失SK-Hep1细胞转线粒体模型的建立及生物学特性分析

摘要 : 建立了线粒体DNA缺失SK-Hep1细胞(ρ°SK-Hep1)转线粒体的模型(SK-Hep1Cyb)， 并探讨了线粒体DNA缺失对肝癌细胞恶性表型的影响。以正常人血小板为外源性线粒体供体， 采用聚乙二醇融合方法建立ρ°SK-Hep1细胞转线粒体模型SK-Hep1Cyb， 并以PCR、Southern杂交及Western杂交进行鉴定， MTT法测定生长曲线， Transwell实验检测细胞侵袭能力， Western杂交检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。PCR、Southern杂交及Western杂交证实成功建立了ρ°SK-Hep1细胞转线粒体模型SK-Hep1Cyb。与SK-Hep1和ρ°SK-Hep1细胞相比， SK-Hep1Cyb细胞群体倍增时间明显延长， 生长速度减慢， 侵袭能力明显下降， 抗凋亡能力下降; 而ρ°SK-Hep1细胞与母本细胞相比生长速度与侵袭能力明显增强， 抗凋亡能力增强。采用细胞融合技术成功建立了ρ°SK-Hep1转线粒体模型。融合细胞肿瘤恶性相关表型如生长速度、侵袭能力、抗凋亡能力明显下降。线粒体DNA损伤对肝癌细胞恶性表型可能有影响， 而恢复正常线粒体功能后或可逆转恶性表型。