骨髓干细胞诱导形成的内皮细胞在体内外环境中的稳定性

摘要 : 采用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate， FITC)标记的CD34 (FITC-CD34)、免疫细胞化学及透射电镜鉴定血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor， VEGF)诱导Sprague-Dawley (SD)大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells， BM-MSCs)分化形成的内皮细胞(诱导组)。应用三维脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix， ADM)支架组织， 接种诱导形成的内皮细胞， 种植于SD大鼠体内生长14天。同时采用不含VEGF的DMEM (DMEM组)和EGM-2培养基(EGM-2组)， 体外培养诱导形成的内皮细胞14天， 酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA)检测各组细胞上清液中内皮素(endothelin-1， ET-1)和VIII因子相关抗原(VIII factor related antigen， F-VIIIAg)含量， 进行统计学处理。实验结果表明， VEGF诱导BM-MSCs培养14天， 细胞呈“铺路石”样排列， FITC-CD34呈现绿色荧光， 免疫细胞化学抗CD31和CD34表达阳性， 细胞质中含Weibel-Palade小体， 具有内皮细胞的特征。在SD大鼠体内生长7天和14天， 内皮细胞保留其特征， 对抗CD31和CD34表达阳性。内皮细胞在体外不含VEGF的DMEM培养基和EGM-2培养基中各培养14天后， 细胞回复到诱导前状态， FITC-CD34反应阴性。ELISA检测DMEM组和EGM-2组中ET-1和F-VIIIAg含量明显低于诱导组( P<0.05)。研究结果显示， BM-MSCs诱导形成的内皮细胞， 在体内环境中生存能保留其特征; 但在缺乏VEGF诱导的体外培养基中生长， 不能维持其特征。

CSTR: 32200.14.cjcb.2009.06.0014