多能性相关基因PouV、Nanog和Sox2在鸡胚原始生殖细胞中的表达

摘要 : 分离19期鸡胚生殖嵴细胞， 采用原始生殖细胞(primordial germ cells， PGCs)-体细胞共培养获得PGCs集落， 借助PGCs特异性标记基因Dazl和Cvh mRNA表达检测、过碘酸雪夫氏(periodic acid-Schiff， PAS)染色、阶段特异性胚胎抗原(stage-specific embryonic antigen， SSEA-1、SSEA-3、SSEA-4)免疫组化检测均表明所形成的细胞团为PGCs。RT-PCR检测及基因测序结果表明干细胞多能性相关基因PouV (Oct4同源基因)、Nanog和Sox2 在鸡PGCs中均有显著表达。在去除饲养层、添加15%血清并采用悬浮培养的条件下， 鸡PGCs在体外可分化形成类胚体(embryoid bodies， EBs)。在PGCs体外分化形成EBs第0 d、3 d、5 d和10 d分别检测Dazl、Cvh、PouV、Nanog 和Sox2 mRNA的表达。结果表明: PouV、Nanog和Sox2在体外培养的鸡PGCs中显著表达， 并且在PGCs体外分化过程中， 其表达量伴随PGCs标记基因Dazl和Cvh一起呈明显下调趋势， 提示PouV、Nanog和Sox2在维持鸡PGCs多能性中起着重要的作用。