重组荞麦胰蛋白酶抑制剂诱导肝癌细胞H₂₂凋亡的作用及其机制

摘要 : 为了研究重组荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)诱导癌细胞凋亡的作用及其机制， 采用细胞培养技术， 以肝癌细胞系H₂₂为靶细胞， 以不同浓度的rBTI体外处理细胞不同时间后， 采用MTT检测、DNA电泳分析、细胞核形态学观察、细胞色素c检测、caspases活性检测等方法测定rBTI在体外诱导肝癌细胞H ₂₂凋亡的作用。结果显示rBTI能够在体外特异性地抑制H₂₂细胞的生长， 诱导H₂₂细胞凋亡， 随着rBTI浓度及作用时间的增加， 呈现剂量和时间依赖性效应。经rBTI处理的细胞可导致细胞色素c从线粒体释放到细胞质中， 并能增强caspase-3、caspase-8、caspase-9的活性。结果表明， rBTI能特异性地诱导H₂₂细胞凋亡， 其机制与caspase-3依赖性凋亡调节信号通路有关。