动态检测血管紧张素Ⅱ刺激后STAT3信号核转位及其与衰老的关系

摘要 : 为了动态观察复制性衰老细胞中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）激活人信号转导与转录活 化因子3(hSTAT3)信号转导途径的核转位情况及该途径在细胞衰老过程中的变化。将载体pMS1- hSTAT3上的目的基因STAT3序列亚克隆到pEGFP-C3报告载体中，构建出pEGFP-hSTAT3质粒； 选择人胚肺二倍体成纤维细胞WI-38细胞株进行细胞培养，通过脂质体 (Effectene)转染的方法，将pEGFP-STAT3质粒分别转染至19代，42代WI-38细胞中；在激光共聚焦显微镜下动态观察血管 紧张素Ⅱ激活STAT3的核转位的变化及不同代数的差别.结果显示AngⅡ刺激细胞后，出现活化的STAT3在胞核内聚集现象，并且在19代细胞中15分钟开始出现，30－45分钟左右时达到高 峰；42代细胞中30分钟左右开始出现，50－60分钟左右达到高峰。因此我们认为AngⅡ刺激WI- 38细胞，能出现hSTAT3信号转导的核内集聚现象；并且随着WI-38细胞传代数的增加，STAT3 信号转导入核时间延迟。说明随着细胞的复制性衰老，通过STAT3通路转导的信号活性逐渐降低，最终影响细胞的增殖，可能是促进细胞衰老的原因之一。