RNA干扰抑制SiHaB2细胞中Bcl-2基因的表达
林学红1 傅更锋1,2 郭 丹1,2 刘新卷2 王建军1,2 徐根兴1,2*
1南京大学生命科学学院,南京210093;2江苏省基因药物工程技术研究中心,南京210049
摘要 : Bcl-2基因作为细胞凋亡的一个潜在抑制剂调节细胞的死亡,抑制恶性肿瘤细胞中Bcl-2基因的表达可促进肿瘤细胞的凋亡。采用RNA干扰技术,合成了含有21个核苷酸的小双链干扰RNA (siRNA-Bcl-2),并构建了含有19个核苷酸基因的质粒载体(pSilencer2.1-U6-Bcl-2),把合成的siRNA-Bcl-2和pSilencer2.1-U6-Bcl-2分别转导入Bcl-2高表达的细胞株SiHaB2中,通过Western 印迹检测,免疫荧光法检测及DNA梯(ladder)检测,可观察到在导入siRNA-Bcl-2和pSilencer2.1-U6-Bcl-2的SiHaB2细胞被培养72 h后,可以明显抑制Bcl-2蛋白的表达。