猪卵母细胞不同孤雌激活方法

胡军和^1,2　徐小明¹　杨春荣¹　窦忠英^1*

¹西北农林科技大学，国家干细胞工程研究中心陕西分中心，杨凌 712100；²榆林学院生命科学学院，榆林719000

摘要 : 研究了离子霉素、电场强度、电脉冲次数和电刺激-化学联合激活对猪卵母细胞孤雌激活的影响，以出现分裂球为激活的标准。结果表明：(1)10 μmol/L离子霉素处理5 min的激活率62.97%(17/27)与处理10 min、15 min的激活率62.50%(15/24)、65.21%(15/23)差异不显著 (P>0.05)。 (2)以电场强度120 V/mm，脉冲次数3次处理猪卵母细胞的激活率66.67%(30/45)与60 V/mm、80V/mm、100 V/mm的激活率40.98%(17/42)、44.11%(15/34)、46.19%(18/39)有显著差异 (P<0.05)，但与140 V/mm、160 V/mm的激活率63.89%(23/36)、64.10%(25/39)无显著差异 (P>0.05)。 (3)以电场强度120 V/mm，不同电脉冲次数进行激活。以2次电脉冲激活猪卵母细胞的激活率67.40%(31/46)与1次、3次电脉冲的激活率62.80%(27/43)、68.30%(28/41)无显著差异 (P>0.05)。 (4)以电场强度120 V/mm，2次电脉冲与10 μmol/L离子霉素处理5 min联合激活猪卵母细胞的激活率84.84%(29/33)与只用电场强度120 V/mm， 2次电脉冲的激活率67.64%(23/34)差异显著(P<0.05)。实验结果表明：电场强度120 V/mm， 2次电脉冲与10 μmol/L离子霉素处理5 min联合处理激活能有效提高猪卵母细胞孤雌激活的激活率。