鸡胚胎原始生殖细胞体外培养

谢　蓓^1,2　黄　海^1,2　胡小芬 ^2,4　曹祥荣¹　黄启忠²　李　震 ^2,3*

¹南京师范大学生命科学学院，南京210097；²上海市农业遗传育种重点实验室，上海201106；³上海市农业科学院畜牧兽医研究所，上海201106；⁴江西农业大学江西省动物生物技术重点开放实验室，南昌330045

摘要 : 以14～15 期鸡胚血液为材料，采用Ficoll 密度梯度离心方法，提取鸡胚胎原始生殖细胞(primordial germ cells，PGCs)，在无基质细胞和基质细胞上分别进行体外培养。从实验结果可以看出：在含有胎牛血清（fetal bovine serum， FBS）、鸡血清（chicken serum，CS）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、人胰岛素样生长因子（hIGF-1）、小鼠白血病抑制因子（mLIF）和青、链霉素双抗的 M199培养液中培养时，鸡PGCs最多能够存活4 天；当采用细胞因子和5 天鸡胚胎性腺基质细胞共培养时能存活23 代且每代细胞增殖可达近10倍。提纯后的PGCs细胞冻存复苏后，经台盼蓝染色鉴定存活率可达 80%左右。