杞菊地黄丸含药血清对高渗诱导角膜上皮细胞线粒体凋亡相关过程的影响

该文旨在评价杞菊地黄丸含药血清对高渗诱导HCE-T角膜上皮细胞损伤的保护作用, 并探讨其与线粒体凋亡相关过程的关系。体外培养HCE-T细胞, 在DMEM/F12培养体系中将培养基最终渗透浓度调至500 mOsmol/L, 建立高渗诱导的体外干眼相关细胞损伤模型。采用不同体积分数的杞菊地黄丸含药血清进行干预, 筛选最佳干预条件后, 将细胞分为Control、Model和QJDH组。CCK-8检测细胞活力; ELISA检测细胞上清液中IL-1β、IL-6、IL-17和TNF-α含量; 试剂盒检测胞内MDA、SOD水平以及上清液中LDH水平; 采用荧光酶标仪检测Caspase-9活性; Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率, 并以TF2-DEVD-FMK流式检测Caspase-3/7活化水平; DCFH-DA、TMRE和MitoSOXTM分别检测细胞ROS、线粒体膜电位和线粒体超氧化物水平; Western blot检测Bax、Bcl-2、AIF、EndoG和Cyt-C蛋白水平。与Control组比较, Model组细胞活力和SOD水平降低, 炎症因子(IL-1β、IL-6、IL-17和TNF-α)水平、MDA水平、LDH水平、细胞凋亡率、Caspase-9活性、Caspase-3/7活化水平、细胞ROS水平及线粒体超氧化物水平均升高, 线粒体膜电位降低; Bax、AIF、EndoG和Cyt-C蛋白水平升高,Bcl-2水平降低(P<0.05)。与Model组比较, QJDH组上述指标总体呈相反变化趋势(P<0.05)。杞菊地黄丸含药血清可减轻高渗诱导的HCE-T角膜上皮细胞损伤, 伴随氧化应激水平降低、线粒体功能改善及线粒体凋亡相关指标下调, 提示其保护作用可能与调节线粒体凋亡相关过程有关, 这为高渗环境下角膜上皮细胞损伤相关疾病的临床干预提供了潜在的实验依据, 也为进一步挖掘杞菊地黄丸的作用靶点与具体分子机制奠定了研究基础。

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