泽泻醇B上调cAMP/PKA信号轴促进脂肪细胞产热
陈坤铃1,2,3 陈林1,2,3 邱剑楠1,2,3 窦晓兵1,2,3 陈思亦1,2,3 卢德赵1,2,3 周丽萍1,2,3*
(1浙江中医药大学生命科学学院, 杭州 310053; 2浙江−香港中医药肝脾同治联合实验室, 杭州 310053; 3浙江中医药大学脂代谢研究所, 杭州 310053)
摘要 :
该文探究泽泻醇B促进脂肪细胞产热的作用及潜在机制。采用棕色鸡尾酒法诱导3T3-L1 MBX前脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞 , 利用CCK-8法检测不同浓度泽泻醇 B对3T3-L1MBX存活率的影响; 油红O染色、拉曼光谱技术观察脂肪细胞内脂滴形成情况; 定量逆转录聚合酶链反应检测脂肪生成相关基因、脂肪分解相关基因、关键产热基因、cAMP/蛋白激酶A(PKA)信号轴相关基因的表达情况; 酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞内环磷酸腺苷(cAMP)水平; 蛋白免疫印迹法检测关键产热基因、cAMP/PKA信号轴相关基因的蛋白表达情况; 采用PKA抑制剂H-89验证cAMP/PKA信号轴在泽泻醇B促进脂肪细胞产热中的作用。结果表明, 泽泻醇B浓度在0~10μmol/L时对3T3-L1 MBX无细胞毒性; 泽泻醇B处理可显著减少脂肪细胞中的脂质积累, 降低脂肪合成相关基因(srebp1c、fas、acc)表达水平, 增加脂肪分解相关基因(hsl、atgl、cpt1)、关键产热基因(ucp1、prdm16、pgc-1α)及其蛋白表达水平, 且呈剂量依赖性; 泽泻醇B处理可上调cAMP/PKA信号轴, 采用H-89抑制剂可逆转泽泻醇B对前脂肪细胞产热的促进作用。这些结果表明, 泽泻醇B通过上调cAMP/PKA信号轴促进前脂肪细胞产热, 抑制脂肪合成, 促进脂质分解。
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