靶向MAGE-C2 TCR-T细胞的构建及功能鉴定
杨超1 王凯2 潘海婷1 武建强1* 苑红1*
(1内蒙古医科大学基础医学院, 呼和浩特 010000; 2内蒙古国际蒙医医院, 呼和浩特 010000)
摘要 :
该研究构建了靶向肿瘤抗原MC2(MAGE-C2)的TCR-T细胞, 评价了其体内、体外特异性抗肿瘤活性, 为MC2阳性肿瘤的过继免疫治疗提供了实验依据。从经MC2多肽刺激培养活化的人CD8⁺ T细胞中筛选获得识别MC2/HLA-A*02:01的特异性TCR, 并通过单细胞测序进行鉴定。筛选得到优势TCR(W2), 经鼠源化改造后将其插入慢病毒载体, 转导至T细胞中; 采用四聚体染色验证TCR的表达水平与抗原特异性。分别以表达MC2的K562细胞和负载多肽的T2细胞为靶细胞, 通过共培养体系检测细胞因子分泌水平及细胞杀伤能力。将W2-TCR-T细胞回输至NCG荷瘤裸鼠模型,评估其体内抑瘤效果。成功获得具有生物学功能的高亲和力W2-TCR-T细胞。该细胞可特异性识别匹配靶细胞, 促进干扰素-γ(interferon-γ, IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)分泌, 并呈剂量依赖性杀伤肿瘤细胞。体内实验结果显示, W2-TCR-T细胞可显著抑制肿瘤生长, 且抗肿瘤效果随输注细胞剂量升高而增强。优化后的靶向MAGE-C2的W2-TCR-T细胞具备良好的抗原识别能力, 可有效清除抗原阳性肿瘤细胞, 体内抗肿瘤作用显著, 具有良好的应用前景。
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