miR-200a-3p靶向调节ALKBH5对碱烧伤小鼠角膜新生血管的影响

该研究旨在探讨微小RNA(miR)-200a-3p靶向调节RNA去甲基化酶AlkB同源物5(AL KBH5)对碱烧伤小鼠角膜新生血管的影响。将108只小鼠分为control组、alkali burn组、AAV-NC组、 AAV-pre-miR-200a-3p组、AAV-pre-miR-200a-3p+pc-NC组、AAV-pre-miR-200a-3p+pc-ALKBH5组, 每组18只, 除control组外, 其余组小鼠均使用浸于1 mol/L NaOH的滤纸进行角膜碱烧伤模型构建。 由眼科医生盲法评估角膜混浊程度; 苏木素–伊红(HE)染色评估角膜组织病理学变化; 马松(Mas son)三色染色评估胶原沉积情况; TUNEL染色检测凋亡情况; 免疫荧光染色检测血小板−内皮细胞 黏附分子(CD31)表达情况; 实时荧光定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测miR-200a-3p水平; Western blot 检测ALKBH5蛋白表达情况; 双荧光素酶报告基因和RIP实验测定miR-200a-3p与ALKBH5的靶向关 系。结果显示, 与control组相比, alkali burn组小鼠角膜混浊评分提高, 角膜基质炎症细胞浸润, 基质 胶原结构松弛, 角膜厚度增加, 胶原体积分数、角膜细胞凋亡率、CD31相对荧光强度及ALKBH5 蛋白表达水平均提高, miR-200a-3p表达水平降低(P<0.05); 与AAV-NC组相比, AAV-pre-miR-200a 3p组小鼠角膜混浊评分降低, 角膜厚度减少, 胶原体积分数、角膜细胞凋亡率、CD31相对荧光强 度及ALKBH5蛋白表达水平降低, miR-200a-3p表达水平提高(P<0.05); 与AAV-pre-miR-200a-3p+pc NC组相比, AAV-pre-miR-200a-3p+pc-ALKBH5组小鼠角膜混浊评分提高, 角膜厚度增加, 胶原体积 分数、角膜细胞凋亡率、CD31相对荧光强度及ALKBH5蛋白表达水平提高(P<0.05); 双荧光素酶 活性结果显示, miR-200a-3p与ALKBH5存在靶向关系(P<0.05)。总结得出, miR-200a-3p通过抑制 ALKBH5表达抑制碱烧伤小鼠的角膜新生血管生成。

CSTR: 32200.14.cjcb.2026.03.0015