探究仙方活命饮抑制三阴性乳腺癌的作用机制及其君药金银花的作用
陆东宇1 孙博宇1 王睿1 赵润1 王大维1 兰天1,2 曾以德1,2*
该文探究中药方剂仙方活命饮抑制三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer, TNBC) 的作用机制及其君药金银花在其中的作用。通过代谢组学结合网络药理学分析以仙方活命饮(仙 方组)、仙方活命饮减金银花(减金组)与金银花水煎液(金银花组)制备的大鼠含药血清中的差异成 分并检索靶点, 将三组差异成分对应的靶点分别与TNBC差异基因表达的靶点进行交集, 筛选核心 靶点并进行通路富集。接着以仙方活命饮和君药金银花抑瘤效应及对关键通路的调控作用进行验证: 在小鼠体内构建TNBC原位移植瘤模型进行药物干预, 将建模成功的小鼠分为模型组、仙方组、减 金组、金银花组、阳性药组(顺铂组), 另放置正常组, 进行动物实验; 以MDA-MB-231细胞为载体进 行加药, 分为Control组、仙方组、减金组、金银花组进行细胞实验。LC-MS检测显示, 仙方组、减 金组与金银花组含药血清分别鉴定出151种、131种和65种差异成分, 对应1 338个、1 316个和1 181 个靶点, 通过与TNBC靶点互作关系后均富集于Cell cycle、PI3K-AKT及Apoptosis等通路, 表明仙 方活命饮可通过凋亡途径对TNBC产生影响。体内实验发现仙方组、减金组与金银花组水煎液对 小鼠肝肾均无明显毒性; 同时, 这些组均能抑制TNBC肿瘤生长; 免疫组化结果显示, 相较于模型 组, 仙方组与金银花组的Bcl-xl表达水平显著降低; Western blot结果显示仙方组与金银花组比模型 组的Caspase-3和Bax表达水平显著增加, 而仙方组、减金组与金银花组比模型组的Bcl-xl表达水平 显著降低; 体外实验则发现, 与Control组比较, 仙方组、减金组与金银花组含药血清均能显著抑制 MDA-MB-231细胞活性; Western blot结果表明, 与Control组比较, 仙方组的Caspase-3表达水平显著 增加, 同时仙方组、减金组与金银花组的Bcl-xl表达水平均显著下降。该研究通过代谢组学和网络 药理学, 经由体内与体外实验的相互印证, 发现仙方活命饮及君药金银花通过多成分−多靶点调控 凋亡途径, 在体内抑制肿瘤生长与体外抑制MDA-MB-231细胞活性方面发挥抗TNBC作用。
中文版
英文版