基于PI3K/AKT/mTOR通路探讨艾司氯胺酮对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响
辛学东1 白宇光1 牛亚清2 解雅英1*
该研究旨在探索艾司氯胺酮调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动 物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响。首先将人软骨细胞分成Con trol组、IL-1β组(10 μg/L IL-1β)、IL-1β+esketamine组(10 μg/L IL-1β和100 μmol/L艾司氯胺酮)、IL 1β+esketamine+LY294002组(10 μg/L IL-1β+100 μmol/L艾司氯胺酮+25 μmol/L LY294002)。各组 细胞增殖情况使用CCK-8法和EdU染色法测定; 各组细胞凋亡情况使用流式细胞仪和TUNEL染色 测定; 各组细胞活性氧(ROS)水平使用DCFH-DA法测定; 各组细胞TNF-α、IL-6、PGE2含量使用 ELISA法检测; NO含量使用格力斯反应检测; 各组细胞凋亡及PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白表达 情况使用Western blot法测定。结果发现, 与Control组比, IL-1β组细胞存活率、EdU阳性细胞率减 少, Bcl-2蛋白表达量、磷酸化(p)-PI3K、p-AKT、p-mTOR水平降低, 而细胞凋亡率, TUNEL阳性率, ROS、TNF-α、IL-6、NO、PGE2水平及Bax、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9蛋白表达量增 加(P<0.05); 与IL-1β组比, IL-1β+esketamine组细胞存活率、EdU阳性细胞率以及Bcl-2、p-PI3K、p AKT、p-mTOR蛋白表达水平升高, 细胞凋亡率, TUNEL阳性率, ROS、TNF-α、IL-6、NO、PGE2 水平以及Bax、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9蛋白表达水平降低(P<0.05); 使用PI3K通路抑 制剂处理可逆转艾司氯胺酮对IL-1β诱导的软骨细胞损伤的改善作用(P<0.05)。总之, 艾司氯胺酮 可能通过激活PI3K/AKT/mTOR通路抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡。
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