细胞与基因治疗产品中慢病毒载体生产与质控要求
陈成 刘晶晶 卢京兰 程海子 吴钦斌*
(和元生物技术(上海)股份有限公司, 上海 201321)
摘要 :
慢病毒载体(lentiviral vectors, LVs)因其能够高效感染分裂和非分裂细胞, 并实现外源基因的长期、稳定表达, 已成为细胞与基因治疗领域最常见的基因递送工具之一, 尤其在CAR-T细胞治疗和遗传病治疗方面具有广泛应用。该文旨在系统综述慢病毒载体的生产与质控要求。该文回顾了慢病毒载体系统的历史发展脉络, 包括其从HIV-1病毒改造而来的发展历程、四代系统的安全性演进, 并对比了国内外在该领域的技术发展路径与监管框架; 系统阐述了当前慢病毒载体生产的主流策略, 包括基于贴壁细胞和悬浮细胞的规模化生产工艺、瞬时转染与稳定生产细胞系构建的优缺点, 以及下游的纯化与浓缩策略; 重点讨论了慢病毒载体的质量控制体系, 涵盖生物学活性(滴度)、纯度、安全性[无菌、支原体、复制型慢病毒(RCL)等]和理化特性等关键指标的检测方法与标准。最后, 展望了慢病毒载体未来发展方向, 包括生产技术的创新(如稳定细胞系开发、无血清悬浮培养工艺)、分析检测方法(新一代测序技术、快速检测方法)的优化以及规模化生产中难题的解决, 以期为推动基于慢病毒载体的细胞与基因治疗产品的临床转化与产业化提供参考。
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