紫花前胡素调节HMGB1-RAGE信号通路对膝骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡的影响

刘佳伟¹ 辛智丰¹ 赛音都楞² 张飞¹*

(¹内蒙古医科大学第三临床医学院(内蒙古包钢医院), 骨科, 包头 014010; ²巴林左旗中医蒙医医院, 骨科, 赤峰 025450)

摘要 :

该研究旨在探讨紫花前胡素(DE)调节HMGB1-RAGE信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠软骨细胞凋亡的影响。首先, 分离、培养KOA大鼠软骨细胞, 并将其随机分为Control组, 模型组, L-DE、M-DE、H-DE组(1、5、10 μmol/L的DE), H-DE+HMGB1组(10 μmol/L DE+3 μg/mL重组HMGB1蛋白)。以甲苯胺蓝染色、II型胶原免疫荧光染色鉴定软骨细胞; CCK-8法检测软骨细胞增殖; 流式细胞术检测软骨细胞凋亡; ELISA法检测软骨细胞上清液中IL-6、TNF-α水平; JC-1检测软骨细胞线粒体膜电位变化; Western blot检测软骨细胞中HMGB1-RAGE信号通路蛋白及C-Caspase-3、Pro-Caspase-3表达。该研究发现, 采用甲苯胺蓝及免疫荧光染色鉴定所分离的大鼠软骨细胞符合要求。模型组软骨细胞较Control组存活率降低, 凋亡率, 上清液中IL-6、TNF-α水平, JC-1 monomers/JC-1 aggregate值, HMGB1、RAGE、C-Caspase-3蛋白表达水平及C-Caspase-3/Pro-Caspase-3值升高, Pro-Caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05); L-DE、M-DE、H-DE组软骨细胞较模型组存活率升高, 凋亡率, 上清液中IL-6、TNF-α水平, JC-1 monomers/JC-1 aggregate值, HMGB1、RAGE、C-Caspase-3蛋白表达水平及C-Caspase-3/Pro-Caspase-3值降低, Pro-Caspase-3蛋白表达水平升高(P<0.05); H-DE+HMGB1组软骨细胞较H-DE组存活率降低, 凋亡率, 上清液中IL-6、TNF-α水平, JC-1 monomers/JC-1 aggregate值, HMGB1、RAGE、C-Caspase-3蛋白表达水平及C-Caspase-3/Pro-Caspase-3值升高, Pro-Caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.05)。总之, DE可通过抑制HMGB1-RAGE信号通路, 进而减少KOA大鼠软骨细胞线粒体相关的细胞凋亡。

CSTR: 32200.14.cjcb.2025.12.0014