薏苡仁提取物对结肠癌细胞增殖、侵袭、化疗敏感性及Shh/Gli1通路的影响
陈晓燕 季秀海* 郁晓瑜 卢敏洁 王学中
该研究将基于音猬因子(Shh)/Gli家族锌指蛋白1(Gli1)通路探讨薏苡仁提取物(CSE)对结肠癌细胞HCT116增殖、侵袭、化疗敏感性的影响。体外培养HCT116细胞, 用细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测不同浓度CSE对HCT116细胞的增殖活性。随机将HCT116细胞分为对照组(C组)、奥沙利铂组(Oxa组)、CSE组、CSE+Oxa组、CSE+Oxa+嘌莫啡胺(PUR)组。采用平板克隆实验检测细胞增殖能力; 划痕愈合实验检测细胞迁移能力; Transwell小室法检测细胞侵袭能力; 一步法TUNEL原位凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率; 免疫印迹法检测半光天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Shh、Gli1蛋白表达情况。构建裸鼠移植瘤模型,以观察肿瘤生长情况。体外实验表明, Oxa组和CSE组相较于C组, CSE+Oxa组相较于Oxa或CSE组,HCT116细胞克隆形成数、划痕愈合率、细胞侵袭数以及Bcl-2、Shh、Gli1蛋白表达水平明显降低(P<0.05), 细胞凋亡率、Caspase-3、Bax水平明显升高(P<0.05); 与CSE+Oxa组比, CSE+Oxa+PUR组HCT116细胞克隆形成数、划痕愈合率、细胞侵袭数以及Bcl-2、Shh、Gli1蛋白表达水平明显升高(P<0.05), 细胞凋亡率、Caspase-3、Bax水平明显降低(P<0.05)。体内实验表明, Oxa组和CSE组相较于C组, 小鼠瘤质量、瘤体积等水平降低(P<0.05), 生长抑制率升高且呈剂量依赖性; CSE+Oxa组较Oxa组或CSE组小鼠瘤质量、瘤体积等水平降低(P<0.05), 生长抑制率进一步升高(P<0.05)。CSE可以抑制HCT116细胞的增殖、迁移、侵袭, 增强化疗敏感性, 作用机制可能与抑制Shh/Gli1信号通路有关。
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