芒柄花黄素调节RhoA/ROCK信号通路对口腔鳞状细胞癌SCC-25细胞增殖、侵袭及凋亡的影响
李昊阳 王哲 冒符荣 颜承曦*
该文旨在探究芒柄花黄素调节RhoA/ROCK信号通路对口腔鳞状细胞癌(OSCC) SCC-25细胞增殖、侵袭及凋亡的影响。用不同浓度芒柄花黄素干预人OSCC细胞系SCC-25后, 采用CCK-8实验筛选芒柄花黄素最佳干预浓度。将SCC-25细胞随机分为正常组、芒柄花黄素组、芒柄花黄素+pcDNA组、芒柄花黄素+pcDNA-RhoA组, 用芒柄花黄素、空载质粒和RhoA过表达质粒分组干预后通过Western blot实验检测各组细胞RhoA/ROCK信号通路相关蛋白表达情况; 利用CCK-8、克隆形成实验检测各组细胞增殖情况; 用流式细胞实验检测各组SCC-25细胞凋亡情况; 采用Transwell、Western blot实验分别检测各组细胞侵袭和上皮–间充质转化(EMT)相关蛋白表达情况;皮下接种SCC-25细胞制备OSCC移植瘤裸鼠, 以同样方法分组后用芒柄花黄素、空载质粒和RhoA过表达质粒分组干预, 测定各组裸鼠移植瘤的瘤体质量、体积; 利用Western blot实验分别检测各组裸鼠移植瘤EMT和RhoA/ROCK信号通路相关蛋白表达情况。与正常组比较, 芒柄花黄素组、芒柄花黄素+pcDNA组细胞活力、集落形成数、细胞侵袭数、移植瘤的瘤体质量与体积以及RhoA、ROCK1、ROCK2、N-cadherin与Vimentin蛋白表达水平均降低(P<0.05), 细胞凋亡率、E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05)。与芒柄花黄素组比较, 芒柄花黄素+pcDNA-RhoA组细胞活力、集落形成数、细胞侵袭数量、移植瘤的瘤体质量与体积以及RhoA、ROCK1、ROCK2、N-cadherin与Vimentin蛋白表达水平均升高(P<0.05), 细胞凋亡率、E-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05); 芒柄花黄素+pcDNA组各指标无明显变化(P>0.05)。芒柄花黄素可抑制RhoA/ROCK信号通路激活, 进而阻碍OSCC细胞增殖、EMT和侵袭, 促进其凋亡。
中文版
英文版