大黄酚通过抑制NLRP3介导的细胞焦亡减轻糖氧剥夺诱导心肌细胞损伤的研究

梅淋^1,2 陈云杰³ 姚月清¹ 谢桢烨¹ 袁茜¹ 安宁⁴* 陈川¹*

(¹厦门医学院药学院, 厦门 361000; ²厦门医学院厦门市中药生物工程重点实验室, 厦门 361000; ³宁波大学附属第一医院药学部, 宁波 315010; ⁴宁波大学附属李惠利医院药学部, 宁波 315000)

摘要 :

该研究旨在探究大黄酚(Chrysophanol, CHR)通过抑制NLRP3介导的细胞焦亡减轻糖氧剥夺(oxygen-glucose deprivation, OGD)诱导H9c2心肌细胞损伤的作用及其分子机制。在OGD条件下刺激H9c2心肌细胞, 构建心肌缺血细胞模型。使用0~80 μmol/L的CHR处理正常和OGD刺激下的H9c2心肌细胞, 筛选最佳药物浓度; 将H9c2心肌细胞随机分为正常培养组(Control组)、大黄酚最佳浓度组(CHR组)、糖氧剥夺组(OGD组)、糖氧剥夺+大黄酚最佳浓度组(OGD+CHR组)、糖氧剥夺+NLRP3激活剂组(OGD+Nig组)、糖氧剥夺+大黄酚最佳浓度+NLRP3激活剂组(OGD+CHR+Nig组)、糖氧剥夺+NLRP3抑制剂组(OGD+MCC950组); CCK-8试剂盒检测H9c2心肌细胞活性; LDH试剂盒检测H9c2心肌细胞损伤情况; IL-1β、IL-18 ELISA试剂盒检测细胞上清液中IL-1β、IL-18分泌情况; TUNEL染色检测H9c2心肌细胞DNA损伤水平; 免疫荧光检测炎性小体NLRP3表达和分布情况; Western blot检测细胞焦亡信号通路相关蛋白表达情况。结果显示, 与Control组相比, OGD组的细胞活力显著下降, IL-1β、IL-18分泌水平, DNA损伤水平, LDH含量和NLRP3、GSDMD-N等蛋白含量显著上升; 与OGD组相比, OGD+CHR组心肌细胞活力上升, IL-1β、IL-18 分泌水平, DNA损伤水平, LDH含量和NLRP3、GSDMD-N等蛋白含量显著下降; 与OGD+CHR组相比, OGD+CHR+Nig组H9c2心肌细胞的DNA损伤水平, NLRP3、GSDMD-N等蛋白含量显著上升, 心肌细胞活力显著下降; 此外, 与OGD+Nig组相比, OGD+CHR+Nig组H9c2心肌细胞NLRP3、GSDMD-N蛋白含量, DNA损伤细胞数量和心肌细胞活力无明显差异; 与OGD+MCC950组相比, OGD+CHR组IL-1β、IL-18分泌水平, LDH含量和NLRP3、GSDMD-N等蛋白含量相似, 但相较于OGD组都有显著的下降。由此提示,CHR可能是通过抑制NLRP3介导的H9c2心肌细胞焦亡, 进而减轻OGD诱导的心肌细胞损伤的。

CSTR: 32200.14.cjcb.2025.08.0007