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栀子苷抑制PI3K/AKT/mTOR通路对宫颈癌细胞增殖、侵袭、自噬的影响


田甜1 李刚2 张峰1 徐淑娜1 李伟华1*

(1济南市人民医院, 药剂科, 济南 271100; 2济南市人民医院, 科教科, 济南 271100)
摘要 :

该文旨在探究栀子苷(GEN)抑制磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶标(mTOR)通路对宫颈癌细胞增殖、侵袭、自噬的影响。将HeLa细胞分别用不同浓度(0、25、50、100 μmol/L) GEN处理或用100 μmol/L GEN和10 μmol/L 740Y-P共同处理, MTT和集落形成实验检测GEN对HeLa细胞增殖的影响; Transwell小室和细胞划痕实验检测GEN对HeLa细胞侵袭和迁移的影响;流式细胞术检测GEN对HeLa细胞凋亡的影响; 吖啶橙(AO)染色以测定自噬过程中出现的酸性囊泡细胞器(AVO)数量; LC3免疫荧光检测HeLa细胞自噬情况; qRT-PCR检测HeLa细胞PI3K、PTEN、AKT、TSC2和mTOR mRNA表达水平; 蛋白质免疫印迹检测HeLa细胞自噬和PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白的表达水平。与GEN-0组比较, 不同浓度GEN组HeLa细胞存活率降低, 集落形成数、侵袭数减少, 迁移率, PI3K、AKT和mTOR mRNA表达水平及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和pmTOR/mTOR水平均下降(P<0.05), 细胞凋亡率、AVO数量、LC3荧光强度、PTEN mRNA表达水平、TSC2 mRNA表达水平、Beclin-1蛋白表达水平、LC3II/I蛋白表达水平上升(P<0.05); 与GEN-100组比较, GEN-100+740Y-P组HeLa细胞存活率增加, 集落形成数、细胞侵袭数增多, 迁移率、PI3K、AKT和mTOR mRNA表达水平及p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR水平上升(P<0.05), 细胞凋亡率、AVO数量、LC3荧光强度、PTEN mRNA表达水平、TSC2 mRNA表达水平、Beclin-1蛋白表达水平、LC3II/I蛋白表达水平下降(P<0.05)。GEN通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路抑制宫颈癌细胞增殖和侵袭,促进细胞自噬。



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