携带TRAIL基因的P28启动子溶瘤腺病毒的抗肝癌研究
金晓婷1,2 刘新垣1,2,3 陈若愚3* 李宁3* 章康健2,3,4*
(1浙江理工大学生命科学与医药学院, 杭州 310018; 2中国科学院分子细胞科学卓越创新中心/生物化学与细胞生物学研究所, 上海 200031; 3上海元宋生物技术有限公司奉贤区院士专家工作站, 上海 201401; 4浙江理工大学, 材料科学与工程学院, 智能生物医学材料研究所, 杭州 310018)
摘要 :
P28(也被称为PSMD10、P28GANK或gankyrin)在肝癌中高表达(96.9%)而在正常细胞中不表达, 因此利用P28启动子设计了具有肝癌靶向性的新型溶瘤病毒载体并在此基础上设计了携带肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand, TRAIL)基因的溶瘤腺病毒(OncoAd-P28-E1A-ΔE1B-TRAIL)。通过OncoAd-P28-TRAIL感染肝癌细胞显示TRAIL蛋白可以在肝癌细胞中高效表达。结晶紫染色显示该病毒可以选择性靶向杀伤肝癌细胞, 且10 MOI对人正常肝细胞没有明显毒性。体外细胞水平杀伤及凋亡研究显示OncoAd-P28-TRAIL对肝癌细胞Huh-7和Hep-3B均有抑制作用, 且呈时间和剂量依赖性, 可以显著促进肝癌细胞凋亡。皮下移植瘤CDX药效显示该溶瘤腺病毒可以促进肿瘤细胞的凋亡及免疫细胞的浸润从而显著抑制肝癌细胞皮下瘤的生长。这些结果提示溶瘤腺病毒OncoAd-P28-TRAIL能有效抑制肝癌的发展, 是一种具有临床应用潜力的肝癌治疗候选药物。
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