miR-141-3p靶向调控KLF9对前列腺癌细胞血管生成拟态形成的影响及其机制探究
刘彼得 王书恒 李循 靳宏勇 张小安 董强 李九智*
该文探讨了miR-141-3p对前列腺癌(prostate cancer, PCa)细胞血管生成拟态(vasculogenic mimicry, VM)形成的作用及其机制。培养人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)和PCa细胞系(PC-3、LNCaP、DU145), 采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测细胞中miR-141-3p的表达情况, Western blot检测细胞中KLF9蛋白质的表达情况, 根据检测结果及该研究的目的, 选择LNCaP和DU145细胞 系进行后续实验。将两种细胞均分为miR-141-3p抑制组、miR-141-3p对照组、KLF9过表达组和 KLF9对照组, 采用miR-141-3p抑制剂下调PCa细胞miR-141-3p的表达, 或采用过表达质粒上调PCa 细胞KLF9的表达后, 通过三维培养实验、CCK-8实验、划痕实验、Transwell实验检测细胞的VM 形成、增殖、迁移及侵袭能力; 通过Western blot检测干细胞标志蛋白的表达情况, 平板克隆形成 实验检测细胞克隆形成能力, 流式细胞术检测CD133+ 细胞比例, 以评估PCa细胞的干细胞特性。双 荧光素酶报告实验和功能回复实验验证miR-141-3p和KLF9的靶向关系。结果显示, 下调miR-141- 3p或上调KLF9的表达均能显著抑制PCa细胞的VM形成及干细胞特性, 并能显著抑制PCa细胞的增 殖、迁移、侵袭; miR-141-3p能够通过靶向抑制KLF9的表达, 从而促进PCa细胞的VM形成及增强 干细胞特性。该研究得出, miR-141-3p通过靶向调控KLF9调节PCa细胞的VM形成, 该调节作用可 能是通过调控PCa细胞的干细胞特性实现的。
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