BMP9通过Wnt/β-catenin和VEGFa信号诱导前脂肪细胞成骨分化
王景江 刘洋*
(重庆医科大学附属第二医院骨科, 重庆 400010)
摘要 :
该文旨在研究Wnt/β-catenin信号通路和血管内皮细胞生长因子a(VEGFa)在骨形态发 生蛋白9(BMP9)诱导前脂肪细胞成骨分化中的作用。通过BMP9重组腺病毒(AdBMP9)感染前脂肪 细胞, 利用Western blot检测β-catenin和VEGFa的蛋白表达水平, 荧光素酶报告质粒检测Wnt/β-catenin 信号活化程度。在过表达或沉默β-catenin及VEGFa后, 用AdBMP9感染细胞, 通过活性测定和染 色检测成骨早期标志物碱性磷酸酶(ALP)的活性, 利用Western blot检测成骨晚期标志物骨桥素 (OPN)、骨钙素(OC)以及成骨转录因子Runt相关转录因子2(Runx2)的蛋白表达情况, 茜素红染色 检测钙盐沉积情况, Micro-CT和H&E染色检测前脂肪细胞在裸鼠皮下异位成骨情况。结果发现 BMP9能上调前脂肪细胞中β-catenin和VEGFa的蛋白水平, 并增加β-catenin/Tcf4转录活性; 激活 Wnt/β-catenin信号或过表达VEGFa能促进BMP9介导的ALP活性、OPN及OC蛋白表达和钙盐沉 积; 过表达β-catenin和VEGFa能促进BMP9诱导的前脂肪细胞裸鼠皮下异位成骨; 过表达β-catenin 和VEGFa均增加了BMP9诱导的成骨转录因子Runx2的活性, 而沉默VEGFa抑制了BMP9上调 β-catenin/Tcf4转录活性的作用。这些结果表明Wnt/β-catenin和VEGFa信号在BMP9诱导前脂肪细 胞成骨分化的过程中起着至关重要的调控作用。
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