积雪草苷调节TIM3/Gal9轴对肺癌细胞上皮–间充质转化和免疫逃逸的影响

该文旨在探讨积雪草苷(Asiaticoside, ATS)调节T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域3(TIM3)/半乳糖凝集素9(Gal9)信号轴对肺癌细胞上皮–间充质转化和免疫逃逸的影响。以不同浓度ATS(0、5、10、20、40、80 μmol/L)处理细胞筛选最佳作用浓度; 将细胞分为对照(control)组、ATS组(25 μmol/L ATS)、ATS+pcDNA-NC组(25 μmol/L ATS+pcDNA-NC)和ATS+pcDNA-TIM3组(25 μmol/L ATS+pcDNA-TIM3), 用CCK-8试剂盒、流式细胞术分别检测细胞的增殖和凋亡情况;用Transwell小室检测细胞的侵袭和迁移情况; 用ELISA检测细胞中TNF-α、IFN-γ和IL-2水平; 用Western blot检测细胞中E-cadherin、Vimentin、PD-L1、TIM3和Gal9蛋白表达水平。使用小鼠构建非小细胞肺癌(NSCLC)模型, 并将其分为control组、ATS组、ATS+AAV-NC组和ATS+AAV-TIM3组, 测量肿瘤体积和质量; 免疫组化染色观察PD-L1、TIM3和Gal9蛋白表达情况。与control组相比,ATS组细胞存活率、细胞迁移数、细胞侵袭数以及Vimentin、PD-L1、TIM3和Gal9蛋白表达水平下降(P<0.05), 细胞凋亡率、TNF-α水平、IFN-γ水平、IL-2水平以及E-cadherin蛋白表达水平上升(P<0.05); 与ATS+pcDNA-NC组相比, ATS+pcDNA-TIM3组细胞存活率、细胞迁移数、细胞侵袭数以及Vimentin、PD-L1、TIM3和Gal9蛋白表达水平升高(P<0.05), 细胞凋亡率、TNF-α水平、IFN-γ水平、IL-2水平以及E-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05)。体内肿瘤实验显示, 与control组相比,ATS组小鼠肿瘤体积和质量均减小(P<0.05), PD-L1、TIM3和Gal9蛋白水平降低; 与ATS+AAV-NC组相比, ATS+AAV-TIM3组小鼠肿瘤体积和质量增加(P<0.05), PD-L1、TIM3和Gal9蛋白水平增多。积雪草苷可能通过抑制TIM3/Gal9信号轴来抑制肺癌细胞上皮–间充质转化和免疫逃逸。

CSTR: 32200.14.cjcb.2024.11.0010