熊果酸对瘢痕成纤维细胞生物学功能及TGF-β1/Smads通路的影响
李大鹏* 刘菲菲 董利焕 王梦楠 靳楷 胡太平 王璞
该文探讨了熊果酸对瘢痕成纤维细胞生物学功能及转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads通路的影响。取对数生长期的增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB), 用不同剂量熊果酸(0、10、20、30、40、50、60 μmol/L)干预HSFB后, MTT法确定细胞存活率; 将HSFB分为对照组(0 μmol/L熊果酸)、L-熊果酸组(20 μmol/L熊果酸)、M-熊果酸组(40 μmol/L熊果酸)、H-熊果酸组(60 μmol/L熊果酸)、H-熊果酸+SRI-011381组(60 μmol/L熊果酸+10 μmol/L TGF-β1/Smads通路激活剂SRI-011381)。流式细胞术和TUNEL染色测定细胞凋亡情况; Transwell实验测定细胞迁移和侵袭能力; Western blot测定各组中TGF-β1/Smads通路蛋白(TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3、Smad4)、纤维化蛋白(Col 1A1、Col3A1、α-SMA)及凋亡蛋白(Bax、Bcl-2)的表达情况。结果显示, 随着熊果酸浓度的增加, HSFB存活率逐渐降低, 且呈剂量依赖性(P<0.05)。与0 μmol/L熊果酸对比, 10、20、30、40、50、60 μmol/L熊果酸处理后细胞存活率降低, 差异显著(P<0.05)。与对照组对比, L-熊果酸组、M-熊果酸组和H-熊果酸组的HSFB凋亡率、TUNEL阳性细胞比例、Bax蛋白表达水平均升高(P<0.05), 迁移细胞数量、侵袭细胞数量以及纤维化标记蛋白(Col 1A1、Col 3A1、α-SMA)、Bcl-2、TGF-β1/Smads通路相关蛋白表达水平均降低(P<0.05), 且熊果酸高剂量相比于低剂量变化程度更显著(P<0.05); 与H-熊果酸组对比, H-熊果酸+SRI-011381组的HSFB凋亡率、TUNEL阳性细胞比例、Bax蛋白表达水平均降低(P<0.05), 迁移细胞数量、侵袭细胞数量以及纤维化标记蛋白(Col 1A1、Col 3A1、α-SMA)、Bcl-2、TGF-β1/Smads通路相关蛋白表达水平均升高(P<0.05)。由此提示, 熊果酸可有效抑制HSFB的增殖、侵袭、迁移和纤维化, 诱导细胞凋亡, 其机制可能与抑制TGF-β1/Smads信号通路激活有关。
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