转录因子KLF4介导纤溶酶原驱动的骨髓来源单核/巨噬细胞向疤痕相关巨噬细胞的转化
杨琳 杨苑儒 李丽英 常娜*
(首都医科大学细胞生物学系, 首都医科大学基础–临床联合实验室,肝脏保护和再生调节北京市重点实验室, 北京 100069)
摘要 :
疤痕相关巨噬细胞(scar-associated macrophage, SAM)是肝纤维化的重要参与者, 纤溶酶原(plasminogen, PLG)可驱动巨噬细胞获得SAM表型, 但其分子机制尚不明确。该研究旨在探讨PLG驱动SAM表型转化的机制。分析已发表的正常、肝纤维化小鼠肝非实质细胞的单细胞测序数据, 发现成熟SAM高表达转录因子Krüppel样因子4(Krüppel-like factor 4, KLF4)。分离小鼠原代骨髓来源单核/巨噬细胞, 使用PLG处理以促进SAM转化, 转染特异性siRNA/过表达质粒以敲减/过表达巨噬细胞中的KLF4, 使用流式细胞术和Western blot检测蛋白表达情况, 免疫荧光检测KLF4的亚细胞定位, 实时荧光定量聚合酶链反应(real time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测mRNA表达情况。结果表明在PLG驱动SAM转化过程中, KLF4蛋白水平升高, 且其定位在细胞核中。特异性敲减小鼠巨噬细胞中的KLF4表达能够抑制PLG驱动的SAM转化, SAM标志基因、功能基因的表达, SAM比例及诱导HSC产生细胞外基质的能力均下降; KLF4过表达则上调了SAM标志基因和功能基因的表达。综上所述, KLF4参与了PLG诱导的SAM表型转化。
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