欧前胡素调节HMGB1-RAGE-NF-κB信号通路对高糖诱导的视网膜内皮细胞损伤的影响

该研究探讨欧前胡素(IMP)调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)-晚期糖基化终产物受 体(RAGE)-核转录因子κB(NF-κB)信号通路对高糖诱导的视网膜血管内皮细胞损伤的影响。使 用10~320 μmol/L的IMP处理高糖诱导的视网膜血管内皮细胞hRECs, 筛选最佳药物浓度; 将视网 膜血管内皮细胞hRECs细胞分为正常糖组(NG组, 5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(HG组, 25 mmol/L 葡萄糖)、低浓度欧前胡素组(IMP-L组, 25 mmol/L葡萄糖+20 μmol/L IMP)、中浓度欧前胡素组 (IMP-M组, 25 mmol/L葡萄糖+40 μmol/L IMP)、高浓度欧前胡素组(IMP-H组, 25 mmol/L葡萄糖 +80 μmol/L IMP)、高浓度欧前胡素+重组HMGB1蛋白组(IMP-H+rHMGB1组, 25 mmol/L葡萄糖 +80 μmol/L IMP+200 μg/L rHMGB1)。CCK-8试剂盒检测hRECs细胞活性; 流式细胞仪检测hRECs 细胞凋亡的情况; 管腔形成实验检测细胞血管生成; 酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞IL-6、肿瘤 坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、MDA水平和SOD水平; Western blot检测HMGB1- RAGE-NF-κB信号通路相关蛋白表达情况。结果显示, IMP可以促进高糖诱导的hRECs增殖, 且呈 浓度依赖性, 选择浓度为20、40、80 μmol/L的IMP进行后续实验; 与NG组比较, HG组细胞存活率、 SOD活性降低, 细胞凋亡率, 管腔形成数, IL-6、TNF-α、IL-1β、MDA水平及HMGB1、RAGE、 NF-κB p65蛋白表达水平升高(P<0.05); 与HG组比较, IMP-L组、IMP-M组、IMP-H组细胞存活率、 SOD活性升高, 细胞凋亡率, 管腔形成数, IL-6、TNF-α、IL-1β、MDA水平及HMGB1、RAGE、NFκB p65蛋白表达水平降低, 且呈浓度依赖性(P<0.05); 与IMP-H组比较, IMP-H+rHMGB1组细胞存 活率、SOD活性显著降低, 细胞凋亡率, 管腔形成数, IL-6、TNF-α、IL-1β、MDA水平及HMGB1、 RAGE、NF-κB p65蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结果表明, IMP可能通过抑制HMGB1-RAGENF-κB信号通路, 降低炎症反应和细胞凋亡水平, 进而减轻高糖诱导的视网膜血管内皮细胞损伤。

CSTR: 32200.14.cjcb.2024.08.0004