LncRNA ASB16-AS1调节miR-185-5p/TRAM2轴对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
靳瑞1 焦合主2 黄颖2 张敏2*
该文旨在探讨长链非编码RNA ASB16-AS1(LncRNA ASB16-AS1)靶向微小RNA-185-5p(miR-185-5p)/易位相关膜蛋白2(TRAM2)轴对口腔鳞状细胞癌(又称口腔鳞癌)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。体外培养人口腔鳞癌细胞SCC-9, 将其分为对照组、sh-NC组、sh-ASB16-AS1组、sh-ASB16-AS1+inhibitor NC组、sh-ASB16-AS1+miR-185-5p inhibitor组。用qRT-PCR法检测各组细胞LncRNA ASB16-AS1、miR-185-5p、TRAM2 mRNA表达水平; 用CCK-8试剂盒检测SCC-9细胞增殖情况; 用流式细胞术检测SCC-9细胞凋亡情况; 用划痕实验检测SCC-9细胞迁移情况; 用Transwell法检测SCC-9细胞侵袭情况; Western blot检测TRAM2蛋白表达水平。双荧光素酶报告实验验证LncRNA ASB16-AS1与miR-185-5p及miR-185-5p与TRAM2之间的靶向关系。与对照组和sh-NC组相比, sh-ASB16-AS1组中LncRNA ASB16-AS1、TRAM2 mRNA、TRAM2蛋白表达水平以及D值、划痕愈合率、细胞侵袭数降低, miR-185-5p水平、细胞凋亡率升高(P<0.05); 与sh-ASB16-AS1+inhibitor NC组相比, sh-ASB16-AS1+miR-185-5p inhibitor组中miR-185-5p水平、细胞凋亡率降低, TRAM2 mRNA表达水平、TRAM2蛋白表达水平、D值、划痕愈合率、细胞侵袭数升高(P<0.05),而LncRNA ASB16-AS1水平无显著变化(P>0.05); 生物学信息网站预测显示miR-185-5p与LncRNA ASB16-AS1和TRAM2均存在靶向结合位点, 且双荧光素酶报告基因实验证实LncRNA ASB16-AS1与miR-185-5p, 以及miR-185-5p与TRAM2之间均存在靶向关系(P<0.05)。在口腔鳞癌细胞中LncRNA ASB16-AS1表达上调, 抑制LncRNA ASB16-AS1的表达可靶向上调miR-185-5p的表达, 抑制TRAM2的表达, 进而促进口腔鳞癌细胞凋亡, 抑制口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭。