β-脱水淫羊藿素通过ROS介导的线粒体凋亡途径诱导MCF-7细胞凋亡
舒晖1 赵岩1 刘芳菲1 韩佳宏1 蔡恩博1* 亓文骞2*
(1吉林农业大学中药材学院, 长春 130118; 2吉林大学中日联谊医院消化内科, 长春 130033)
摘要 :
该文旨在探究β-脱水淫羊藿素对人非小细胞肺癌细胞A549、人乳腺癌细胞MCF-7、人前列腺癌细胞PC-3M、人子宫颈鳞癌细胞SiHa和人胰腺癌细胞PANC-1的抗肿瘤活性, 并对筛选出抑制活性最佳的细胞株初步探讨其抗肿瘤作用机制。采用MTT法检测不同浓度β-脱水淫羊藿素对5种肿瘤细胞增殖的影响, 并以IC50作为标准, 筛选出β-脱水淫羊藿素抑制作用较为突出的乳腺癌MCF-7细胞进行后续实验; DAPI染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况; DCFH-DA法检测细胞的活性氧水平; Calcein AM探针检测线粒体通透性转换孔开放情况; JC-1探针检测线粒体膜电位变化;分子对接技术预测β-脱水淫羊藿素与活性氧相关蛋白SIRT3之间的结合能力; Western blot检测细胞中线粒体凋亡途径相关蛋白SIRT3、Cytochorme C、Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、PARP、Cleaved PARP的表达水平。结果显示: β-脱水淫羊藿素能够通过调控SIRT3蛋白表达水平刺激肿瘤细胞活性氧水平升高, 使得MCF-7细胞线粒体功能发生障碍, 进而刺激线粒体通透性转换孔异常开放, 使得膜电位大幅度降低, 最终诱导MCF-7细胞凋亡, 且这些影响可能是通过活性氧介导的线粒体凋亡途径实现的。
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