SEZ6L2通过ECM-受体信号调节肺鳞癌细胞的增殖与凋亡

该研究探讨癫痫相关6同源物样2(seizure-related 6 homolog like 2, SEZ6L2)对肺鳞癌 (lung squamous cell carcinoma, LUSC)细胞的增殖与凋亡的影响及其潜在的作用机制。该研究采 用癌症基因组图谱数据库(The Cancer Genome Atlas, TCGA)分析SEZ6L2在肺鳞癌组织中的表达情 况; 采用实时逆转录聚合酶链式反应(real-time reverse transcriptase-polymerase chain reaction, RTqPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测正常人支气管上皮细胞BEAS-2B和肺鳞癌细胞(NCIH520、NCI-H1703、SK-MES-1)中SEZ6L2表达情况; 采用RT-qPCR和Western blot检测SEZ6L2的干 扰效率; 采用CCK-8、EdU染色法和细胞克隆实验检测细胞增殖水平; 采用细胞划痕和侵袭实验检 测细胞迁移水平和侵袭能力; 采用流式细胞术和Western blot检测细胞凋亡水平及凋亡相关蛋白的 表达水平; 借助基因集合富集分析(gene set enrichment analysis, GSEA)软件, 分析SEZ6L2在细胞外 基质(extracellular matrix, ECM)-受体信号中的富集情况; 借助linkedomics和基于基因表达水平值的 交互式分析平台(gene expression profiling interactive analysis, GEPIA)分析SEZ6L2与ECM-受体信号 蛋白整合素Β3(integrin beta 3, ITGB3)、整合素Β6(integrin beta 6, ITGB6)、整合素α3(integrin alpha 3, ITGA3)的关系; 采用Western blot检测ITGB3、ITGB6、ITGA3及其下游信号蛋白磷酸化黏着斑 激酶(phosphorylated focal adhesion kinase, p-FAK)、p-SRC、FAK、SRC的表达情况。该研究发现, TCGA数据库显示SEZ6L2在肺鳞癌组织中的表达水平增加, 且表达水平越高LUSC患者预后越差; 与BEAS-2B组比较, SEZ6L2表达在肺鳞癌细胞NCI-H520、NCI-H1703和SK-MES-1中显著上调, 且 在NCI-H1703细胞中表达水平最高。因此, 选择NCI-H1703细胞做后续研究。构建SEZ6L2的干扰 质粒, SEZ6L2在si-SEZ6L2-3组中表达水平更低, 表现出更好的转染效率, 因而选择si-SEZ6L2-3(以 下简称为si-SEZ6L2)进行后续研究。干扰SEZ6L2表达后, 与si-NC组比较NCI-H1703细胞增殖、迁 移和侵袭水平下降, 凋亡水平上升, 促凋亡蛋白Bax和cleaved caspase3表达水平增加, 抗凋亡蛋白 BCL2表达水平下降, ECM-受体信号蛋白ITGB3、ITGB6、ITGA3及其下游信号蛋白p-FAK、p-SRC 表达水平下调。该研究得出, SEZ6L2通过ECM-受体信号调节肺鳞癌细胞的增殖、迁移、侵袭和 凋亡。

CSTR: 32200.14.cjcb.2024.05.0008