HucMSC-Ex调控自噬增强高糖环境下真皮成纤维细胞功能
缪徐1 李淋丽2 钱晖1* 许文荣1* 史惠1*
(1江苏大学医学院, 江苏省医学科学与检验医学重点实验室, 镇江 212000; 2南京医科大学附属常州第二人民医院, 常州 213000)
摘要 :
该研究旨在探讨在高糖损伤模型中, 人脐带间充质干细胞源外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cell-derived exosome, hucMSC-Ex)对真皮成纤维细胞(dermal fibroblasts, DFs)的影响, 并探究自噬在糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcer, DFU)修复中的作用。通过多种方法(包 括形态分析、粒度测量、表面标记表征等)对hucMSC和hucMSC-Ex进行全面的鉴定。同时, 使用 Western blot和免疫荧光分析鉴定原代DFs表面标志物。通过流式细胞术、qRT-PCR、活性氧(reactive oxygen species, ROS)检测以及线粒体膜电位的检测, 分别评估高糖损伤模型中DFs的凋亡情况、炎 症因子表达水平、活性氧产生情况和线粒体功能。为了深入研究自噬在修复DFU中的作用, 该研 究通过免疫组织化学染色和Western blot技术检测DFU患者组织中LC3BII/I的表达情况, 并提取组 织蛋白进行自噬相关蛋白的表达差异情况分析。此外, 在使用自噬诱导剂和抑制剂后, 对DFs给予 hucMSC-Ex处理, 观察其增殖和迁移情况。研究结果表明, hucMSC-Ex可能通过调控自噬反应来增 强高糖损伤下DFs的功能, 从而促进DFU的修复。
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