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CircTMOD3调节miR-139-5p/ROCK2轴对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响


杨小军1* 欧阳运萍2 陈涛2 李鹏2 赵博2

(1唐山职业技术学院附属医院重症医学科, 唐山 063000; 2唐山职业技术学院附属医院急诊科, 唐山 063000)
摘要 :

该文旨在探讨CircTMOD3调节miR-139-5p/Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK2)轴对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤的影响。该研究采用体外培养人肺泡上皮细胞A549, 将A549细胞分为control组、LPS组、LPS+si-NC组、LPS+si-CircTMOD3组、LPS+si-CircTMOD3+inhibitor NC组、LPS+si-CircTMOD3+miR-139-5p inhibitor组; 用qRT-PCR检测各组细胞CircTMOD3、miR-139-5p和ROCK2表达水平; CCK-8和EdU法检测细胞增殖情况; 流式细胞术检测细胞凋亡率; ELISA试剂盒检测TNF-α、IL-6和IL-1β水平; 相关试剂盒检测MDA、SOD、CAT水平; Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、ROCK2蛋白表达量; 双荧光素酶报告基因实验验证miR-139-5p与CircTMOD3和ROCK2的关系。结果显示, 与control组相比, LPS组A549细胞中CircTMOD3水平、ROCK2 mRNA表达水平、TNF-α水平、IL-6水平、IL-1β水平、MDA水平、凋亡率、Bax表达水平、ROCK2蛋白表达水平显著升高, miR-139-5p表达水平、增殖活力、CAT水平、SOD水平、Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05); 与LPS组和LPS+si-NC组比较, LPS+si-CircTMOD3组A549细胞中CircTMOD3表达水平、ROCK2 mRNA表达水平、TNF-α水平、IL-6水平、IL-1β水平、MDA水平、细胞凋亡率、Bax蛋白水平、ROCK2蛋白水平显著降低, miR-139-5p表达水平、增殖活力、CAT水平、SOD水平、Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05); 与LPS+si-CircTMOD3+inhibitor NC组相比, LPS+siCircTMOD3+miR-139-5p inhibitor组A549细胞中ROCK2 mRNA表达水平、TNF-α水平、IL-6水平、IL-1β水平、MDA水平、细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平、ROCK2蛋白表达水平显著升高, miR139-5p表达水平、增殖活力、CAT水平、SOD水平、Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-139-5p与CircTMOD3和ROCK2存在靶向调控关系。该研究得出, 干扰CircTMOD3表达可以上调miR-139-5p表达抑制ROCK2表达, 减轻LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤。