水苏碱调节EPAC1/Rap1信号通路对H/R诱导的心肌细胞凋亡的影响

该文旨在探究水苏碱(STA)调节环腺苷酸直接激活的交换蛋白1(EPAC1)/Ras相关蛋白1(Rap1)信号通路对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡的影响。将H9C2细胞分为对照组、模型组(H/R)、H/R+STA(5 μmol/L STA)组、H/R+8-CPT(EPCA1激动剂8-CPT, 30 μmol/L)组、H/R+STA+8-CPT组 (5 μmol/L STA+30 μmol/L 8-CPT)、H/R+ESI-09(EPCA1抑制剂 ESI-09, 1 μmol/L)组、H/R+STA+ESI-09组(5 μmol/L STA+1 μmol/L ESI-09)。利用CCK-8法检测H9C2细胞增殖情况; DCFH-DA法检测H9C2细胞活性氧(ROS)水平; 流式细胞术检测H9C2细胞凋亡情况; 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测心肌细胞中EPAC1、Rap1的mRNA表达水平; Western blot检测心肌细胞中EPAC1、Rap1、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达水平。结果显示: 与对照组比较, H/R组H9C2细胞中ROS水平、细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平以及EPAC1、Rap1的mRNA及蛋白表达水平均显著升高, 细胞增殖活力和Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05); 与H/R组相比,H/R+STA组和H/R+ESI-09组H9C2细胞中ROS水平、细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平以及EPAC1、Rap1的mRNA及蛋白表达水平均显著降低, 细胞增殖活力和Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05),而H/R+8-CPT组指标与上述趋势相反(P<0.05); 与H/R+STA组相比, H/R+STA+8-CPT组H9C2细胞中ROS水平、细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平以及EPAC1、Rap1的mRNA及蛋白表达水平均显著升高, 细胞增殖活力和Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05), 而H/R+STA+ESI-09组指标与上述趋势相反(P<0.05)。总之, STA可能通过抑制EPAC1/Rap1信号通路, 改善由H/R诱导的心肌细胞凋亡。