LncRNA MALAT1在视网膜母细胞瘤组织中的表达及靶向miR-145-5p/SOX9轴对Y79细胞生物行为的影响

严肖啸¹ 尹双慧² 李小静³ 孙敏⁴*

(¹邯郸市中心医院眼科, 邯郸 056001; ²邯郸邯钢医院内科, 邯郸 056001; ³邢台医专附属第二医院骨科, 邢台 054002; ⁴华北石油管理局总医院眼科, 沧州 062552)

摘要 :

该文旨在探讨长链非编码RNA(LncRNA)肺腺癌相关转录本1(MALAT1)在视网膜母细胞瘤(RB)组织中的表达情况, 及靶向微小RNA(miRNA)-145-5p/性别决定区Y框蛋白9(SOX9)轴对Y79细胞生物行为的影响。qRT-PCR检测RB组织和Y79细胞中MALAT1、miR-145-5p、SOX9 mRNA相对表达量; 荧光原位杂交(FISH)实验、双荧光素酶报告基因实验验证MALAT1、SOX9 与miR-145-5p的靶向关系 ; 将Y79细胞分为 sh-NC组、sh-MALAT1组、sh-MALAT1+miR-NC 组、sh-MALAT1+miR-145-5p inhibitor组、mimics-NC组、miR-145-5p mimics组、miR-145-5p mimics+pcDNA组、miR-145-5p mimics+SOX9组, MTT法和细胞克隆实验检测细胞增殖; 流式细胞术检测细胞凋亡; Transwell小室检测细胞迁移和侵袭; Western blot检测SOX9、Ki67、MMP9、 Bcl-2、Cleaved Caspase-3蛋白表达情况。体内肿瘤形成实验验证MALAT1对RB肿瘤的影响。结果显示, MALAT1在RB组织和Y79细胞中高表达(P<0.05); FISH实验、双荧光素酶报告基因实验证实MALAT1、SOX9与miR-145-5p存在靶向关系; 沉默MALAT1或过表达miR-145-5p可抑制Y79细胞增殖、迁移和侵袭, 促进凋亡(P<0.05); 抑制miR-145-5p或过表达SOX9可逆转沉默MALAT1或过表达miR-145-5p对Y79细胞生物学行为的影响(P<0.05); 体内实验显示, 抑制MALAT1表达可显著抑制小鼠移植瘤的生长(P<0.05)。MALAT1在RB组织和Y79细胞中高表达, MALAT1可通过调节 miR-145-5p/SOX9信号轴, 参与Y79细胞生物学行为。