黄芩苷介导PI3K/AKT通路减轻脂多糖诱导的 心肌细胞凋亡及炎症反应

为探讨黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导的大鼠心肌细胞凋亡、炎症及磷脂酰肌醇3-激酶 (PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的调控作用, 该研究体外培养大鼠心肌H9C2细胞, 将其分为对照组 (不做干预)、LPS组(10 μg/mL LPS)、实验组(10 μg/mL LPS+10、20、40、80 μmol/L黄芩苷)、黄芩苷 +Y组(10 μg/mL LPS+10 μmol/L黄芩苷+5 μmol/L PI3K/AKT通路抑制剂LY294002)、抑制剂组(10 μg/mL LPS+5 μmol/L LY294002)和黄芩苷+A组[10 μg/mL LPS+10 μmol/L黄芩苷+100 ng/mL PI3K/AKT通路激 活剂胰岛素样生长因子-I(IGF-I)]。用细胞计数试剂盒-8测定细胞活力; 酶联免疫吸附试验检测炎症因 子白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6和IL-10的含量; Hoechst33258染色法测定细胞凋亡率; 5-乙炔基-2’脱氧 尿嘧啶核苷测定细胞增殖率; 蛋白免疫印迹法测定PI3K/AKT相关蛋白、细胞周期蛋白D1(CyclinD1) 和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平。结果表明, 与对照组相比, LPS组细胞活力显 著降低(P<0.05), 与LPS组相比, 10 μg/mL LPS+10 μmol/L黄芩苷组细胞活力显著升高(P<0.05), 因此选 择10 μmol/L黄芩苷进行后续实验。与对照组相比, LPS组IL-10含量、细胞增殖率、CyclinD1蛋白表达 水平显著降低(P<0.05), IL-6含量、IL-1β含量、细胞凋亡率、Caspase-3、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水 平显著升高(P<0.05); 与LPS组相比, 黄芩苷组(即10 μg/mL LPS+10 μmol/L黄芩苷组)和抑制剂组H9C2 细胞中上述指标的变化趋势被显著扭转了(P<0.05); 与黄芩苷组相比, 黄芩苷+Y组IL-10含量、细胞增 殖率、CyclinD1蛋白表达水平显著升高(P<0.05), IL-6和IL-1β含量、细胞凋亡率、Caspase-3、p-PI3K 和p-AKT蛋白表达水平显著降低(P<0.05); 黄芩苷+A组与黄芩苷+Y组指标变化情况相反(P<0.05)。总 之, 黄芩苷可通过阻断PI3K/AKT通路的信号转导抑制LPS诱导的大鼠心肌H9C2细胞的凋亡及炎症反 应