体外诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞分化为5-羟色胺敏感性神经元
舒 畅 李廷玉* 黄巧茵1 刘妙贞 1 曾丽玲1 朱 虎1 苟毓林 1 钟耀华1 陈小章1
重庆医科大学附属儿童医院,重庆400014; 1香港中文大学生理系上皮细胞研究中心,香港
摘要 : 体外诱导成年大鼠骨髓间充质干细胞分化为具有神经元表型和部分功能的细胞。在对Woodbury化学诱导法作改良的基础上,加用全反式视黄酸对骨髓间充质干细胞作预诱导。诱导3h后,细胞开始表现神经元的形态特征,细胞折光性增强,形成收缩的双极或多极胞体和细长突起。细胞可以维持神经元样存活72h以上。诱导5h后,对免疫染色的细胞用DAPI进行复染,(92.4±6.9)% 的细胞表达神经元特异性烯醇化酶。诱导24 h后,(93.9±5.2)%的细胞表达成熟神经元的标志物神经丝M+H。在给予5-羟色胺刺激时可以产生与神经元相似的胞内钙离子峰,且免疫组化证实5-羟色胺1A受体在干细胞上表达微弱,但在分化后的神经元中表达较强。实验不仅从形态、细胞标志物而且从功能上证实诱导后的细胞为5-羟色胺敏感性神经元。