老年C57BL/6J小鼠内皮细胞上S1PR1对血迷路屏障通透性的影响

余蒙^1,2 余苗^2,3 孙诗恒² 王皓阳² 曾宪思² 刘志丹² 姜文君^1,2 李丽^1,2*

( ¹浙江中医药大学基础医学院, 杭州 310000;² 嘉兴学院医学院, 基础医学部, 嘉兴 314000; ³石河子大学医学院生理教研室, 石河子 832002)

摘要 :

该研究通过检测不同月龄C57BL/6J小鼠血管纹上S1PR1的表达情况, 进一步探究老年耳蜗血管纹内皮细胞上S1PR1变化对血迷路屏障通透性的影响。用听性脑干反应(auditory brain response, ABR)检测听觉功能; 伊文思蓝染色检测耳蜗血迷路屏障的通透性; 免疫荧光检测耳蜗血管纹上S1PR1和紧密连接蛋白表达水平; ELISA检测S1P的释放量; Transwell小室检测内皮细胞通透性; Western blot检测EC上S1PR1和紧密连接蛋白的表达水平。结果显示, 12m组小鼠听力阈值明显增高且高频听力损失明显, 耳蜗血迷路屏障通透性升高, S1PR1和紧密连接蛋白表达水平均降低。在细胞水平, D-gal+EC组中S1P的释放量降低, S1PR1表达水平下降, 加入外源S1P后, S1PR1表达水平增加; D-gal+EC组紧密连接蛋白表达水平降低, 内皮细胞通透性增加, 加入外源S1P后, 紧密连接蛋白表达水平增加, 内皮细胞通透性降低, 给予S1PR1抑制剂干预后, 紧密连接蛋白表达水平降低, 内皮细胞通透性增加。在衰老状态下, 耳蜗血管纹内皮细胞上S1PR1表达下降, 这可能会下调紧密连接蛋白的表达, 进而影响血迷路屏障通透性。