LncRNA SRA通过MEK/ERK/GATA4通路调控KGN细胞系炎症作用的机制研究

徐芳¹ 梁锦铃² 潘紫萌² 马明³ 孙淼¹* 匡洪影¹*

(¹黑龙江中医药大学附属第一医院妇科二科, 哈尔滨 150040;²黑龙江中医药大学第一临床医学院, 哈尔滨 150040;³黑龙江中医药大学附属第一医院外科, 哈尔滨 150040)

摘要 :

该研究主要探究LncRNA SRA在PCOS卵巢局部炎症中的调控机制, 以及MEK/ERK/GATA4 通路在此调控机制中的可能作用。选用人类卵巢颗粒细胞肿瘤细胞系KGN, 采用细胞转染技术, 将KGN分为未转染组(Control)、LncRNA SRA过表达空载体对照组(Vector)、LncRNA SRA 过表达载体转染组(LncRNA SRA)、LncRNA SRA过表达空载体+PD98059处理组(MEK的抑制剂) (Vector+PD98059)、LncRNA SRA过表达载体+PD98059处理组(LncRNA SRA+PD98059)。采用RTqPCR检测各组细胞中LncRNA SRA表达水平; MTT法检测细胞增殖; 流式细胞术检测细胞凋亡; Western blot检测cleaved-Caspase-3、Caspase-3、p-MEK1/2、MEK1/2、p-ERK1/2、ERK1/2、p-GATA4、 GATA4、p-p65和SGMS2蛋白表达量; ELISA检测各组细胞中TNF-α、IL-6和IL-1β炎症因子表达水平。结果发现, 抑制MER通路不仅能够抑制LncRNA SRA引起的KGN细胞增殖活力的升高、炎症反应和 MEK/ERK/GATA4通路相关蛋白的高表达水平, 而且能够促进LncRNA SRA引起的KGN细胞中凋亡率的降低。这提示高表达LncRNA SRA可以降低KGN细胞的凋亡率, 且能够促进增殖并诱发炎症反应的发生, 而抑制MEK可以逆转此种反应现象的发生。这说明LncRNA SRA/MEK/ERK/GATA4通路可能是调控PCOS卵巢颗粒细胞局部炎症微环境的重要作用途径。