circEPSTI1通过靶向调控miR-216b-5p调节胃癌细胞顺铂耐药性

该研究的目的是为了观察circEPSTI1是否通过靶向调控miR-216b-5p对胃癌细胞顺铂 耐药性产生影响, 并探讨其可能的作用机制。采用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)检测胃癌组织、癌旁组织、人胃黏膜细胞GES-1、人胃癌细胞 HGC27与胃癌耐药性细胞HGC27/DDP中circEPSTI1与miR-216b-5p的表达情况; 使用双荧光素酶报 告实验验证circEPSTI1与miR-216b-5p的靶向调控关系; 以HGC27/DDP细胞为研究对象, 实验分组: si-NC组、si-circEPSTI1组、si-circEPSTI1+anti-miR-NC组、si-circEPSTI1+anti-miR-216b-5p组; 采 用CCK-8法、平板克隆形成实验、流式细胞术与Transwell实验分别检测细胞增殖、克隆形成、凋 亡、迁移及侵袭; Western blot检测Cleavea-caspase 3、Cleavea-caspase 9、E-cadherin、N-cadherin蛋 白表达情况。结果显示, 与癌旁组织相比, 胃癌组织中的circEPSTI1表达上调(P<0.05), miR-216b5p表达下调(P<0.05); 与GES-1细胞相比, HGC27细胞、HGC27/DDP细胞的circEPSTI1表达上调 (P<0.05), miR-216b-5p表达下调(P<0.05); 与HGC27细胞相比, HGC27/DDP细胞的circEPSTI1表达 上调(P<0.05), miR-216b-5p表达下调(P<0.05); miR-216b-5p过表达可降低wt-circEPSTI1的荧光素 酶活性(P<0.05), 未影响mut-circEPSTI1的荧光素酶活性; 与si-NC组相比, si-circEPSTI1组细胞增殖 抑制率、凋亡率和Cleavea-caspase 3、Cleavea-caspase 9、E-cadherin蛋白表达上调(P<0.05), 克隆 形成数、迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05), N-cadherin蛋白表达下调(P<0.05); 与si-circEPSTI1+antimiR-NC组相比, si-circEPSTI1+anti-miR-216b-5p组细胞增殖抑制率、凋亡率和Cleavea-caspase 3、 Cleavea-caspase 9、E-cadherin蛋白表达下调(P<0.05), 克隆形成数、迁移及侵袭细胞数增加(P<0.05), N-cadherin蛋白表达上调(P<0.05)。结果表明, circEPSTI1通过靶向抑制miR-216b-5p表达促进胃癌 耐药性细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭, 抑制胃癌耐药性细胞凋亡, 从而增强胃癌细胞对DDP的 耐药性, 该机制可能与改变凋亡相关蛋白表达情况和逆转上皮–间质转化过程有关