雷帕霉素对STZ诱导的HT22细胞损伤的保护作用

该研究探究雷帕霉素对链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)诱导的HT22细胞损伤的神经保 护作用。利用STZ诱导HT22细胞建立神经细胞损伤模型, 给予HT22细胞不同浓度的雷帕霉素进行预 保护, 采用MTT法筛选STZ造模浓度和雷帕霉素最佳保护浓度; 将HT22细胞分为对照组(con)、模型 组(STZ)和雷帕霉素组(Rap), HE染色观察神经细胞形态及突触结构; Hoechst 33342染色观察细胞凋亡 情况; 相应的商品试剂盒检测各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量; Western blot法检测细胞p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR、NR2B、NR1、PSD 95蛋白 表达情况。实验结果显示, 与对照组相比, STZ可明显导致HT22细胞损伤, 1.0 μmol/L雷帕霉素对STZ 诱导的神经损伤具有最佳保护效果; 与对照组相比, 模型组细胞突触结构损伤严重, STZ诱导HT22 细胞凋亡, SOD活性显著下降(P<0.05), LDH活性(P<0.001)、MDA含量显著上升(P<0.001), p-AMPK/ AMPK(P<0.001)、NR2B(P<0.001)、NR1(P<0.05)、PSD 95(P<0.001)蛋白表达水平显著下降, p-mTOR/ mTOR蛋白表达水平显著上升(P<0.001)。与模型组相比, 雷帕霉素能保护神经细胞形态和突触结构, 抑制细胞凋亡, 提高SOD活性(P<0.05), 降低LDH活性(P<0.001)、MDA含量(P<0.01), 上调p-AMPK/ AMPK(P<0.001)、NR2B(P<0.05)、NR1(P<0.05)、PSD 95(P<0.01)蛋白表达水平, 下调p-mTOR/mTOR 蛋白表达水平(P<0.01)。总之, 雷帕霉素能减轻STZ诱导的HT22细胞氧化应激损伤, 抑制细胞凋亡, 保 护神经细胞突触结构, 其机制可能与AMPK/mTOR通路调控突触蛋白PSD 95和NMDA受体活性有关。